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微滴式数字PCR系统（图）
数字PCR系统 重点实验室
2023/8/8
中文名称：微滴式数字PCR系统，主要性能指标：1、能将每个样品的反应体系分为数万个纳米级的微滴，每个微反应体积＜0.91nl，直径为120μm，微反应体系均匀稳定 2、能对DNA与RNA分子（无需进行逆转录）进行直接的绝对定量；能检测到单拷贝基因及250万分之一的突变； 3、可同时处理8个样品，约2min； 4、具有两个检测通道，可同时检测2个目标基因；结合特殊的探针设计，可进行5重基因分析； 5...
该成果研发了一种鸭新城疫、鸭瘟和鸭坦布苏病毒病的多重PCR检测引物，包括针对鸭新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭坦布苏病毒的引物。建立了多重PCR体系，可准确检测水禽NDV、DPV、DTMUV的单一或混合感染，并对该多重PCR体系进行了优化，确定了最佳的引物比例、引物浓度和Premix rTaq酶，使得NDV、DPV、DTMUV3种病毒的DNA扩增效果更好，检测精度更高，在鉴别时具有重要优势。
钝裂银莲花花色素合成相关基因qRT-PCR内参基因的筛选
钝裂银莲花 实时荧光定量PCR 内参基因 筛选 稳定性 类黄酮/花青素合成途径
2021/3/12
为了筛选适合于钝裂银莲花类黄酮/花青素合成途径中相关基因qRT-PCR表达分析时的内参基因，根据钝裂银莲花蓝/白不同花色花器官组织的转录组测序结果，选取了多聚泛素酶基因（polyubiquitin，UBQ）、微管蛋白基因（β-tubulin，β-TUB）、水通道蛋白基因（aquaporin，AQP）、肌动蛋白基因（actin，ACT）、甘油醛–3–磷酸–脱氢酶基因（glyceraldehyde-3...
采用2种重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将5种立克次体目的基因片段进行融合，同时对2种方法进行比较。方法?采用一步法及两步法融合基因技术，对5种立克次体融合基因进行构建，并优化一步法中重叠引物浓度以及两步法中各靶基因产物加入量，以提高2种方法的融合效率。
为了建立鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus, AngHV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法，利用PCR扩增出AngHV ORF49的序列，克隆至pET-32a载体，构建重组质粒pET-32a-ORF49，作为qPCR的标准品；根据ORF49序列设计引物，以梯度稀释的质粒标准品为模板，进行SYBR Green Ⅰ qPCR扩增，制作标准曲线，建立...
建立一种基于多重实时荧光定量PCR(MRT-PCR)技术的可同时检测14种高危亚型人乳头瘤病毒(HPV16、18、31、33、35、39、52、45、51、56、58、59、66、68)癌基因E6/E7 mRNA的方法。方法?对14种高危型HPV各自的E6/E7基因序列区域设计特异性引物和探针，配以优化的反应体系，形成HPV E6/E7 mRNA检测体系，评价方法检出限、特异性。收集223例临床样...
现场技术审核对PCR 实验室质量管理的影响分析
聚合酶链式反应 质量管理 室间质评
2021/3/22
总结临床PCR 实验室参加室间质量评价活动的PT 结果，探讨现场审核与否对室间质评结果的影响， 进而分析实验室现场审核对其质量管理的影响。方法 统计分析2008~2019 年陕西省临床检验中心PCR(HBV-DNA， HCV-RNA) 参评实验室室间质评活动结果。
五种玉米病毒多重PCR检测体系的建立
五种玉米病毒 多重PCR检测体系 建立
2021/6/3
玉米在我国农业生产中占据重要地位，而病毒病的长期发生严重威胁我国玉米产业。随着病毒鉴定技术的发展，目前已报道侵染我国玉米的病毒有12种之多（张超等，2017）。病毒检测是病害防控中的重要环节，但田间玉米病毒种类的多样性及其复合侵染的普遍性增加了鉴定难度。
QF-PCR技术联合染色体核型分析在羊水产前诊断中的应用
荧光定量聚合酶链反应 染色体核型分析 羊水 产前诊断 非整倍体 一致性分析
2021/1/5
探讨QF-PCR联合染色体核型分析在羊水产前诊断中的应用价值。方法 回顾性分析 2011年1月至2018年12月在广州市妇女儿童医疗中心产前诊断中心行产前诊断的16 314例孕妇资料，所有羊水标本同时采用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction，QF-PCR)技术和染色体核型分析技术进行分析。
为确定在云南文山地区喜树上发生的疑似丛枝病的病原种类及快速检测喜树丛枝病,本研究利用植原体16S rDNA基因通用引物P1/P7和R16F2n/R16R2对感病喜树总DNA进行常规PCR和巢式PCR扩增、克隆和测序,通过系统进化分析,明确了喜树丛枝植原体属于16SrXXXII组。然后根据喜树丛枝病植原体16S rDNA基因保守区域设计并合成特异性引物和TaqMan探针,制备了喜树丛枝病植原体标准质...
应用两个厂家生产的试剂盒平行检测新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染的肺炎（COVID-19）患者样本， 对其检测效果进行实验室应用评价。方法 A，B 两试剂盒共同靶基因为ORF1ab 和N，B 试剂盒增加靶基因E；两试 剂盒同为磁珠核酸提取，RT-PCR 扩增法。