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烟草中TMV、CMV和PVY多重RT-PCR检测体系的建立与应用
烟草 多重RT-PCR 病毒检测 应用
2010/12/6
利用DNAMAN软件对GenBank数据库中已登录的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY)全基因组序列进行序列比对,选择最保守的区域,进行相应病毒的引物设计,建立了多重RT-PCR检测烟草中TMV、CMV和PVY的技术体系。对3条扩增片段进行回收...
实时荧光RT-PCR检测By33蛋白抑制TMV复制的作用
实时荧光定量PCR 活性蛋白 复制
2010/12/6
供试烟草NC89接种TMV后6 h,接种叶悬浮于By33无菌活性蛋白、无菌水中48 h,实时荧光RT-PCR检测病毒RNA复制量,结果显示:悬浮于By33蛋白50、100倍液的处理,病毒RNA复制量分别为0.302434和0.411478 ,低于悬浮于无菌水处理(0.438963)。悬浮叶研磨接种三生烟,悬浮于By33蛋白50、100倍液处理与悬浮于无菌水处理比,枯斑抑制率分别为96.97和97....
利用电镜负染色法及Tospovirus病毒不同血清组DAS-ELISA检测试剂盒,从具有典型叶脉间斑块状褪绿、黄化及褐色坏死症状的白肋烟病株中检测到Tospovirus病毒;利用根据Tospovirus病毒N-gene中部分片段保守序列设计的引物,建立了RT-PCR特异检测Tospovirus病毒的方法。