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摘要 胰岛素样生长因子 1(IGF 1)是一种多功能的细胞增殖调控因子 ,其表达水平受多种因素的影响 ,为了研究IGF 1基因在转录水平上的调控机制 ,建立了定量测定IGF 1mRNA的竞争性PCR方法 .同时 ,也建立了一种简便的制备同源性竞争模板的方法 .以构建好的重组pUC IGF 1质粒为基础 ,利用IGF 1mRNA序列上唯一存在 ,但是在pUC18质粒上多拷贝的MspⅠ酶切位点 ,以该...
人肝癌细胞的IGF-BP1分子特性及内源性蛋白酶对其降解的研究
胰岛素样生长因子结合蛋白-1 分子结构 分子量 内源性蛋白酶 降解
2007/12/24
摘要 用SDS-PAGE电泳、高效液相色谱（HPLC）、质谱等方法，研究了人肝癌细胞（HepG2）分泌的胰岛素样生长因子结合蛋白-1（35S-IGF-BP1）的分子结构、特性，及其被内源性蛋白酶降解的特点．35S-IGF-BP1经抗体免疫沉淀、生化分离，纯化为均一体．其分子是由多个亚基构成的蛋白质，分子量约为27kD；细胞UMR、HepG2、H35。BRL3A分泌的蛋白酶能将35S-IGF-BP1...
摘要 细胞增殖必伴有染色体的一分为二及细胞质的增生，β微管蛋白则参与细胞的增殖过程．正性和负性调节因子对β微管蛋白的表达及细胞增殖间的相关性研究显示，不同生理剂量的正性调节因子ＩＧＦⅡ、Ｔ３／Ｔ４处理ＵＭＲ１０６细胞１２ｈ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ实验发现它们在促进细胞ＤＮＡ合成的同时，可使β微管蛋白ｍＲＮＡ表达增加，呈剂量依赖关系．而负性调节因子ＴＮＦα则相反地在抑制细胞ＤＮＡ合成的同时，使β微...
摘要 应用３Ｈ－ＴｄＲ参入，流式细胞技术和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ等方法，观察了ＥＧＦ和ＩＧＦ－Ⅰ对ＵＭＲ１０６细胞增殖及β微管蛋白表达的影响。结果显示，两种生长因子分别处理ＵＭＲ１０６细胞１２ｈ，在促进细胞ＤＮＡ合成的同时，β微管蛋白ｍＲＮＡ的表达量明显提高。运用间接免疫荧光技术及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ方法，研究发现两种生长因子可使微管聚合及微管蛋白的表达有所增加。提示β微管蛋白的合成及...