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中国科学院深圳先进技术研究院声镊转染技术为细胞治疗提供新工具(图)
细胞 治疗 免疫
2024/6/23
癌症严重危害人民的生命健康,嵌合抗原受体T 细胞(CAR-T)免疫疗法是最具前景的肿瘤疗法之一,被誉为“癌症治疗的第四次革命”。细胞转染是CAR-T细胞治疗的关键技术,通过基因转导的方法转染患者的T细胞,表达嵌合抗原受体,使得患者的T细胞被“重编码”后,能够特异性识别肿瘤细胞,从而进行选择性杀伤,细胞转染直接影响了CAR-T的疗效和安全性。
国际权威期刊 Nature Communications(《自然•通讯》)在线发表化学与分子科学学院周翔教授团队和邓鹤翔教授团队在MOF(Metal-organic framework,金属有机框架材料)及DNA领域的合作研究成果。该工作报道了新型介孔MOF材料的设计合成及生物应用拓展,首次实现了单链DNA在非病毒载体中大量负载、精确保护及高效释放,并采用最具挑战的免疫细胞验...
肝细胞生长因子基因转染对人淋巴瘤细胞凋亡的影响
肝细胞生长因子 基因转染 凋亡
2012/7/17
探讨肝细胞生长因子(HGF)基因转染人淋巴瘤细胞系Raji细胞后, 拮抗足叶乙甙(VP-16)诱导细胞凋亡的研究。将三种细胞: 未转染Raji细胞、空载体pVITRO2-mcs转染细胞和HGF基因转染细胞, 分成正常对照组和经VP-16处理的药物组。采用Western blot法验证HGF蛋白的表达;CCK-8法检测诱导Raji细胞凋亡的药物浓度; 通过透射电镜、流式细胞术、吖啶橙(AO)染色、苏...
水压转染法在小鼠不同肝叶的表达效率
小鼠 肝脏 水压转染法 增强型绿色荧光蛋白
2012/7/20
为了解水压转染法(hydrodynamics-based transfection, HDT)在小鼠肝脏不同肝叶的转染效率, 将容量为小鼠体重的10%, 绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP-C1含量为35 μg/只的生理盐水溶液以0.4 mL/s的速度从小鼠尾静脉注射, 于注射后不同时间取小鼠各肝叶制备冰冻切片, 在荧光显微镜下观察, 计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况。结果显示注射后12 h, 绿色荧...
复合环境离子强度对BDCP/DNA的粒径与转染效率的影响
聚乙烯亚胺 基因转染 非病毒载体
2009/11/2
为了探讨组装环境对基因载体/DN复合物的粒径和转染效果的影响,在三种不同离子浓度溶液体系(PBS, 5% 葡萄糖溶液, H2O)中测量BDCP(biodegradable cationic polymer,一种生物可降解的阳离子聚合物)/DNA复合物粒径和结合力,进行了体外转染试验和毒性试验.结果显示,PBS最适合组装转染复合物,可取得更好的稳定性、最高的转染效率和较低细胞毒性、低溶血率;在5%葡...
重离子辐射提高腺病毒介导小鼠黑色素瘤细胞转染率的研究
腺病毒 重离子辐射
2009/10/27
探讨12C6+ 离子束辐射对用带有绿色荧光蛋白基因的缺陷性腺病毒(AdCMVGFP)转染小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞系)的影响。 采用不同剂量的12C6+ 重离子束辐射经AdCMVGFP 转染的B16细胞, 利用流式细胞仪检测腺病毒的转染率。 结果表明, 12C6+重离子束辐射能提高腺病毒对B16细胞的转染率, 且具有量效关系。 此外, 先转染后辐射法比起先辐射后转染法能更显著地提高转染率。
用于体外基因转染的氨基硅烷Fe3O4复合纳米粒子的合成及表征
纳米四氧化三铁 磁性材料 体外转染 基因载体
2010/1/19
利用2-吡咯烷酮和乙酰丙酮铁为原料制备Fe3O4磁性纳米颗粒, 用XRD和TEM对样品进行了表征. 选择偶联剂γ-氨丙基三乙氧基硅烷[NH2C3H6Si(OC2H5)3]对纳米粒子进行表面修饰, 制得APTTS/Fe3O4复合载体材料. 以此复合粒子作为传递载体, 将CD基因转染U251胶质瘤细胞. 采用RT-PCR, Western blot及免疫荧光等方法检测CD基因的表达及功能. 结果表明,...
硅纳米颗粒作为基因转染载体的研究
硅纳米颗粒 氯化纳 基因转染 载体
2008/1/30
摘要 通过不同浓度的NaCl、NaI修饰硅纳米颗粒,用琼脂糖凝胶电泳分析硅纳米颗粒与DNA结合力及对DNA的保护作用,同时用绿色荧光蛋白基因作报告基因,以硅纳米颗粒作为基因转染的载体,转染HT1080细胞。 经电镜观察证实硅纳米颗粒进入细胞内;硅纳米颗粒与DNA结合后,能对DNA起保护作用;并且硅颗粒作为基因转染的载体,将绿色荧光蛋白基因导入HT1080细胞,用荧光显微镜观察到发绿色荧光的细胞。结...
摘要培养人高转移肺腺癌细胞系Anip973,构建其cDNA表达文库并转染小鼠成纤维细胞NIH3T3,将经药物筛选后的转染细胞克隆消化为单细胞,接种到软琼脂中培养2周,根据细胞明显的形态学变化挑选出有意义的细胞克隆,扩增再培养,提取DNA,PCR扩增插入片段并进行测序分析。结果表明:软琼脂中挑选出克隆100多个,PCR测序后,得到3个已知基因包括人类核糖体蛋白L23、人类假定蛋白FLJ22104和人...
人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤细胞的初步研究*1)
人鼠嵌合抗体 转染 骨髓瘤J558L
2008/1/16
本文介绍了通过人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤J558L的研究,叫详尽地阐述了用原生质体融合发将重组的人鼠嵌合抗体重链基因转染到J558L骨髓瘤细胞中,并用ELSA法检测转染子的过程和方法,同时简要地说明了影响转染率的一些因素。
外源基因转染导致小鼠体细胞过快衰老 及p16INK4a表达水平变化
外源基因
2008/1/11
摘要对小鼠胎儿成纤维细胞进行外源基因转染时发现, 外源基因转染后的小鼠体细胞染色体端粒的长度以每代47 bp碱基缩短; 在转染后的衰老细胞中, 或细胞随着增龄, p16INK4a 5′-调控区DNA甲基化程度逐渐降低; 利用RT-PCR与Northern blot证明, 衰老细胞与年轻细胞中的p16INK4a基因的表达水平存在显著差异, 传代45代的细胞和外源基因转染后的衰老细胞p16INK4a基...
脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化
脂质体 绿色荧光蛋白 牛胎儿成纤维细胞 转染
2007/12/29
通过脂质体(FuGENE-6)介导,将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,探讨影响外源基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现,绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加,延长细胞暴露时间反而使转染效率下降,转染细胞数适当才...