搜索结果: 46-60 共查到“理学 E. coli”相关记录98条 . 查询时间(0.155 秒)
摘要 采用微量热法研究了硝酸镧对Escherichia coli B生长代谢过程的影响, 发现高浓度硝酸镧引起E. coli B热谱图出现异常变化: 生长速率常数k值增大、产热峰显著升高和总发热量异常增加. 当硝酸镧浓度为300和500 mg/L时, 培养物在培养过程的总发热量分别是正常条件下的3.89和2.54倍. 用生物学方法对细胞存活率和生物量进行测定结果表明, 细胞在高浓度硝酸镧条件下增殖...
摘要 通过聚合酶链反应 ( PCR)自人脾 c DNA扩增 RO 蛋白 ( 60 k D)编码 DNA片段 .将该片段定向插入麦芽糖结合蛋白 ( MBP)融合系统的 p MALTM- c载体中并转化 E.coli ( DH5α) ,通过酶联免疫印迹 ( IBT)筛选出具有 RO 抗原性的阳性克隆 .绝大部分阳性克隆表达完整的 RO 融合蛋白 ( 1 0 0k D) .但在传代过程中表达水平很快降低...
摘要 纳豆激酶是一种纤维蛋白溶解酶 ,有望开发成为新型的溶栓药物 .从中国豆豉中分离的具有较强纤溶活性的枯草杆菌DC 2中提取总DNA ,根据纳豆激酶 (NK)基因序列设计引物 ,用PCR法扩增NK基因 .序列分析表明 ,NK基因成熟肽编码区含有 82 5bp ,编码 2 75个氨基酸残基 ,与文献报道的序列分别有 93 4 %和 94 5 %同源性 .将NK基因插入载体pGEX 4T1构建表达...
抗菌肽Diptericin cDNA的克隆及在E.coli中的融合表达
伏蝇素 MBP融合蛋白 RT-PCR 融合表达
2007/12/21
摘要 从果蝇成虫中抽提总 RNA,RT- PCR扩增编码伏蝇素 diptericin的 c DNA,克隆并测定了全序列 .将该 c DNA亚克隆到融合表达载体 p MAL- CR1上 ,转化大肠杆菌 BL2 1菌株 ,进行了高效的可溶性融合表达 .通过离子交换层析纯化融合蛋白 ,经 Xa因子酶切后得到的重组 diptericin具有抗菌活性 .
pBR322-Red介导的E．Coli染色体基因敲入、位点及表达研究
pBR322-Red 重组工程 基因敲入 霍乱毒素B亚单位
2007/12/20
摘要应用pBR322-Red介导的重组工程系统，Kan/sacB选择反选择系统，双链线性DNA重组技术和重叠引物介导的DNA重组技术，将长度为1 653 bp的luc报告基因分别敲入到E.coli W3110染色体lacZ, lacY和lacA基因的位置，建立了一系列具有新遗传表型的菌株：CWL2、CWL4和CWL6。荧光素酶分析表明，外源报告基因luc能在这3个结构基因处有效的组成型表达。为了进...
传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆及在E.coli中的表达
传染性支气管炎病毒 核衣壳蛋白基因 克隆 非融合表达
2007/12/20
摘要 核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片段序列与其他IBV病毒株比较 ,核苷酸的同一性为 87 0 %～ 98 6 %,氨基酸的同一性为 91 0 %～ 98 1...
E.coli的Prlc基因产物对OmpA前体蛋白翻译后转位的功能
OmpA前体 prlc基因 转位 大肠杆菌膜囊
2007/12/19
摘要 使用OmpA为指示蛋白,我们证实了prlc基因产物主要定位在胞液中,在分泌蛋白的转位过程中,它不是一个必需因子,但它的确涉及OmpA前体的转位定域。使用印迹试验证明它可能是一个信号肽水解酶。
E.coli galk和gpt基因重组质粒(pIDB103)导入金鱼受精卵内的研究
基因转移 分子杂交
2007/12/19
摘要 用显微注射法把含有E.coli galk和gpt基因的环状和线状重组DNApIDB103分别导入金鱼受精卵的细胞质内。这些注射过的卵子一般都能正常发育。从各不同发育时期的胚胎分离DNA与~(32)P标记的pIDB103探针杂交表明,导入的环状外源重组DNA在胚胎发育的早期,绝大部分以各种环状构型存在。从原肠胚晚期开始,它们逐渐形成串联状高分子量DNA。在尾芽期仍能检测到它们的序列。但尚未证明...
人源CDC50基因的分子克隆及在E.coli中的表达
糖皮质激素受体 协同抑制因子 人源CDC50 克隆与表达
2007/12/19
摘要 糖皮质激素受体 (GR)为一种特异性配体诱导的转录因子在机体发育、生理及行为等过程中发挥重要作用 .这一过程往往受到转录协同调节因子的控制 ,包括协同抑制因子或协同激活因子的作用 .克隆了人源双跨膜受体分子 ,并命名为hCDC5 0 .该分子编码区有 10 5 6bp ,与鼠源基因mCDC5 0在核苷酸水平有 90 %一致性 .将hCDC5 0蛋白的 16 4～ 317编码序列与GST融合构...
苏云金杆菌以色列亚种cryIVB基因在E.coli中的高表达
Ｂｔｉ ｃｒｙＩＶＢ 基因表达 韭菜迟眼蕈蚊
2007/12/18
摘要 韭菜迟眼蕈蚊（Ｂｒａｄｙｓｉａｏｄｏｒｉｐｈａｇａ）幼虫以取食根部危害韭菜的生长．为了研究有效的生防制剂，采用ＤＮＡ聚合酶链式反应方法，从苏云金杆菌以色列亚种（Ｂｔｉ）得到３．５ｋｂ的开放阅读框架（ＯＲＦ），其包括Ｂｔｉ杀虫蛋白基因ｃｒｙＩＶＢ的结构基因和部分上游启动区．将结构基因亚克隆到高表达载体ｐＱＥ５２中，构建了高表达质粒ｐＱＥ５２Ｂ．在Ｅ．ｃｏｌｉＳＧ１３００９（ｐＲＥＰ４）中，经Ｉ...
酵母系统表达TPO与E.coli表达TPON端结构域生物半衰期比较
血小板生成素 糖基化 生物半衰期
2007/12/18
摘要 为了探讨血小板生成素（ＴＰＯ）糖基化与其生物半衰期的关系，首先纯化了巴氏毕赤酵母系统分泌表达的人ＴＰＯ成熟肽和大肠杆菌表达的人ＴＰＯＮ端结构域蛋白．纯化产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定和活性分析后，两种蛋白以相同浓度或相同活性单位给Ｗｉｓｔｅｒ大鼠尾静脉注射，利用酶联免疫分析（ＥＬＩＳＡ）和ＴＦ１细胞测定不同时间点实验动物血浆中ＴＰＯ浓度或生物学活性，求出两种ＴＰＯ的生物半衰期（ｔ１／２）值...
摘要 人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）是一种重要的造血生长因子．利用基因重组技术构建两个ｈＧＭ－ＣＳＦ的Ｅ．ｃｏｌｉ表达菌株，一个为在不改变氨基酸顺序的前提下，对ｍＲＮＡ翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ）），另一个为未突变的对照（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ））．经酶切电泳、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等分析鉴定，证明两者均能表达特异性的１４．６ｋＤｈ...
人白介素6受体功能区片段在E.coli中的表达
人白介素６受体 克隆和表达 大肠杆菌 免疫印迹
2007/12/17
摘要 通过ＤＮＡ体外重组技术，以ｐＥＴ－３ｂ为表达载体，构建了重组表达质粒ｐＥＴ－６Ｒ（Ｂ）和ＰＥＴ－６Ｒ（Ｂ）４，分别编码２８ｋＤ的ｈＩＬ－６Ｒ配基结合区片段及其５３ｋＤ的二联体蛋白，并为酶切分析和ＤＮＡ序列分析所证实。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，含有重组表达质粒的菌株可分别表达出２８ｋＤ的蛋白ｒＩＬ６Ｒ－２８和５３ｋＤ的ｒＩＬ６Ｒ－５３。重组蛋白分别占菌体总蛋白的４５％和２９％左右。重组蛋白主要...
摘要 采用ＰＣＲ技术从Ｅ．ｃｏｌｉ基因组片段中克隆出碱性磷酸酯酶（ＰｈｏＡ）的启动子和信号肽序列．在ＰｈｏＡ启动予５＇端设计了ＥｃｏＲⅠ酶切位点，在信号肽编码序列３＇端设计了ＨｉｎｄⅢ酶切位点．将ＰＣＲ产物酶切后ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ片段克隆至ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ位点，组构出含有ＰｈｏＡ启动子和信号肽序列的分泌表达载体ｐＢＭ－Ｐｈｏ－１．之后将人表皮生长因子的成熟肽基因克隆至该载体...
大肠埃希菌氨基糖苷类耐药株aac(3)Ⅱ基因保守区分析Conserved Region Analysis of aac(3)ⅡGene From E.coli Aminoglycoside Resistance Strain
温州医学院检验与公共卫生学院 细胞与分子医学研究所 温州
2007/12/7
摘要常规方法分离鉴定47株大肠埃希菌，以标准纸片扩散法(KB法)对其进行常用氨基糖苷类药物敏感性测定，耐药株经PCR检测aac(3)Ⅱ基因保守区，扩增产物进行DNA测序分析。初步探讨大肠埃希菌氨基糖苷类抗生素耐药株与aac(3)Ⅱ基因保守区之间的关系，结果显示本地区大肠埃希菌氨基糖苷类抗生素耐药株的aac(3)Ⅱ基因保守区具65位G、84位T和65位A、84位C两种基因型，且高...