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现场技术审核对PCR 实验室质量管理的影响分析
聚合酶链式反应 质量管理 室间质评
2021/3/22
总结临床PCR 实验室参加室间质量评价活动的PT 结果,探讨现场审核与否对室间质评结果的影响, 进而分析实验室现场审核对其质量管理的影响。方法 统计分析2008~2019 年陕西省临床检验中心PCR(HBV-DNA, HCV-RNA) 参评实验室室间质评活动结果。
上海交通大学医学院组织化学和免疫组织化学课件 PCR及原位PCR的原理和方法。
上海交通大学医学院医学实验技术课件第三节 PCR及点突变。
上海交通大学医学院分子生物学课件 PCR技术及其在临床诊断中的应用。
广西1例人田鼠巴贝虫感染巢式PCR鉴定及其同事感染调查
田鼠巴贝虫 巢式PCR 分子生物学
2015/7/8
目的 确诊1例国内感染田鼠巴贝虫的病例,对患者周边同事进行调查,初步了解田鼠巴贝虫在广西人群中的分布情况。 方法 提取患者及相关人士血液DNA,共计121份,进行巢式PCR鉴定。以扩增患者18S rRNA基因为分子标记,与GenBank中各巴贝虫序列进行同源性分析,采用最大似然率法(maximum likelihood)构建系统进化树,分析亲缘关系。 结果 患者感染田鼠巴贝虫病,患者周边同事共40...
基于PCR蜱体内巴贝虫检测方法的评价
巴贝虫 蜱 PCR 评价
2015/7/8
目的 分别对4种牛体表蜱体内巴贝虫和两种犬体表蜱体内巴贝虫基于PCR的检测方法进行评价。 方法 在广西壮族自治区6个市的62个村,现场采集犬和牛体表蜱。巢式PCR特异性扩增巴贝虫18s rDNA,纯化阳性样本的PCR产物、测序、比对,以确定感染的病原体。应用双重 PCR、双重巢式PCR、双重环介导等温扩增 (loop-mediated isothermal amplification, LAMP)...
荧光定量PCR确诊1例输入性恶性疟病例
恶性疟原虫 镜检 荧光定量PCR 诊断
2014/9/25
采用镜检法和荧光定量PCR法对青田县1例输入性疟疾患者血样进行检测。镜检结果显示,患者血样的薄、厚血片中均发现恶性疟原虫,但其原虫密度均较低,为240个/μl血;PCR结果显示,该血样恶性疟原虫特异性DNA片段阳性,确诊为恶性疟原虫感染。
分别于我国南疆地区捕获长管白蛉64只、吴氏白蛉66只和亚历山大白蛉20只。本研究基于COⅠ基因序列差异,建立了鉴别我国南疆3种常见蛉种的多重PCR。结果显示,长管白蛉、吴氏白蛉和亚历山大白蛉的PCR产物分别为248、632和395 bp,且多重PCR结果与形态学鉴定结果完全一致。
PCR-RFLP鉴定我国黑热病流行区6种常见蛉种
PCR-RFLP 白蛉 黑热病 媒介
2014/6/15
建立鉴定我国黑热病流行区 6 种常见蛉种的 PCR-RFLP(PCR-restriction fragment length polymorphisms)方法。方法 使用一对通用引物扩增线粒体 COI 基因, 比较中华白蛉、长管白蛉、吴氏白蛉、亚历山大白蛉和歌乐山司蛉线粒体 COI 基因序列, 寻找合适的限制性内切酶酶切位点, 使用TaqI、PstI内切酶双酶切, 通过电泳片段大小鉴别上述 6 种...
2012年6~8月采集云南元江县、巧家县、永善县和景洪市牛棚和人房周围附近环境的饱血按蚊,制作蚊胃血滤纸血膜。多重PCR法检测采集的按蚊胃血样品,分析不同按蚊在当地的嗜血习性。采集的145只按蚊中,中华按蚊123只(占84.8%),微小按蚊22只(占15.2%)。145份按蚊胃血样品中,共134份扩增出相应条带,其中猪血源104份,牛血源22份,犬血源4份,人血源2份,猪和牛混合血源1份,猪和人混...
间日疟原虫环子孢子蛋白PCR-RFLP多态性分析
河南 间日疟原虫 环子孢子蛋白 基因型
2014/2/18
采集2011年河南省间日疟原虫阳性患者血样,用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)法分析环子孢子蛋白(circumsporozoite protein,CSP)基因型,并结合流行病学资料进行初步种群分布分析。共采集间日疟患者血样37份,根据流行病学调查确定河南当地感染病例血样26份,输入性病例血样11份。37份血样均扩增出1条约750 bp的条带。PCR-RFLP结果显示,CSP基...
以突变Tomlinson I库中筛选的抗细胞黏附分子L1的胞外区单链抗体为例, 对定点突变和随机突变两种构建噬菌体抗体次级库的方法进行比较。方法 设计定点突变和随机PCR引物在基因水平经PCR、酶切、连接将已有噬菌粒引入突变后转染大肠杆菌构建噬菌体次级抗体库; 之后使用噬菌体ELISA确定阳性单克隆比例, 采用皮尔森χ2检验进行比较。结果 两种方法构建的次级抗体库库容分别为1.4×106 pfu/...
实时荧光定量PCR检测RAW264.7巨噬细胞中Th1/Th2型细胞因子转录水平方法的建立及初步应用
实时荧光定量 PCR检测RAW264.7 巨噬细胞 Th1/Th2型细胞因子 转录水平方法 初步应用
2013/9/17
建立小鼠RAW264.7巨噬细胞的Th1和Th2型细胞因子荧光定量PCR检测方法。方法 依据GenBank中小鼠的β-actin基因序列、 Th1型及Th2 型细胞因子的核苷酸序列设计特异性引物, 以RAW264.7巨噬细胞mRNA反转录后的cDNA为模板, 通过构建质粒阳性标准品, 建立检测上述细胞因子转录水平的real-time PCR方法。结果 用建立的荧光定量PCR方法, 检测牛型布鲁氏菌...
PCR-RFLP检测输入性恶性疟原虫 Pfcrt基因多态性
输入病例 恶性疟原虫 Pfcrt基因 多态性
2013/3/11
了解来自不同流行区输入性恶性疟原虫Pfcrt基因K76T的点突变情况,探讨恶性疟原虫Pfcrt基因多态性。 方法 采集2008-2012年从非洲(尼日利亚、赤道几内亚、刚果、利比里亚、安哥拉和马里)和东南亚(缅甸和印度尼西亚)等疟疾流行区回国人员恶性疟现症患者血样共72份,根据恶性疟原虫Pfcrt基因序列设计巢式PCR引物,以血样中的恶性疟原虫DNA为模板,进行巢式PCR,扩增产物经限制性内切...