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伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立
伪狂犬病病毒 微滴数字PCR 检测方法
2018/4/2
为了建立伪狂犬病病毒（PRV）微滴数字PCR（droplet digital PCR，ddPCR）的检测方法，以伪狂犬病病毒gB基因为靶基因，建立了可对其准确定量的微滴数字PCR方法。对ddPCR反应中的引物浓度、探针浓度、退火温度进行了优化。对建立的ddPCR方法的特异性和敏感性也进行测定，并且应用于临床样品的检测。结果表明，ddPCR的最佳引物浓度为0.9 μmol·L-1，探针浓度为0.25...
旨在建立一种检测马Toll样受体（TLRs）mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR（Rverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）方法。参照GenBank中马TLRs的基因序列保守区设计特异性引物，以马β肌动蛋白（β-actin）mRNA为内参，建立荧光定量RT-PCR方法。结果，扩增曲线在1×102～1×108 copies...
为了调查产气荚膜梭菌在健康鸡群中的流行现状，掌握我国部分地区规模化鸡场产气荚膜梭菌的遗传多样性，分析其流行特点与地区差异的关系，利用AFLP（amplified fragment length polymorphism）和ERIC-PCR（enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR）方法对从四川省8个市10个规模化鸡场分离得到的34株A型...
对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测，结果表明，沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性，耐药率达100%，对其四环素耐药基因tetC进行了扩增，结果获得以质粒为模板的特异性产物，与药敏试验结果阳性符合率75%，具有较高的检出率。用光生物素对PCR产物进行标记，制备核酸探针，采用菌落原位杂交的方法对沙门氏菌进行检测，结果表明13株阳性、3株阴性，杂交结果与PCR结果阳性符合率为93.75%，具有较...
猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究
猪附红细胞体 PCR 微孔板杂交 检测
2008/4/2
以猪附红细胞体和多种血营养菌的16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/ HM-r，在反向引物的5' 端用生物素标记，以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针，探针的5' 端用地高辛标记，成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫法检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值，用SPSS统计软件进行回归分析，得到回归方程...
用ELISA和PCR对猪、牛血清中HBV抗原、抗体及DNA的检测。