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猪Ob-Rb基因的克隆与分析
猪 Ob-Rb基因 克隆 序列分析
2010/1/7
[目的] 采用RTPCR法克隆与分析瘦素受体ObRb cDNA序列。 [方法]从160日龄初情期的苏姜猪的下丘脑中提取组织总RNA, 根据GenBank中猪ObRb mRNA全序列设计引物, 用反转录-聚合酶链式反应(RTPCR)进行cDNA扩增, 获得1条343 bp的片段, 将PCR产物克隆于pGEMT easy载体后进行测序分析。[结果] 用紫外分光光度计检测所提取的RNA...
瘦蛋白对体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA表达的影响
瘦蛋白 脂肪细胞 Ob-Rb mRNA 体外培养
2008/4/22
取单层生长良好的脂肪细胞,采用单因素试验,分别添加浓度为5 ng/mL外源牛重组瘦蛋白(每12 h添加1次)不添加作为对照至4、12、24、36、48和72 h后提取总RNA,每个处理3个重复(孔),应用竞争RTPCR法检测外源瘦蛋白对初生犊牛脂肪细胞Leptin长型受体(Ob-Rb)表达水平的影响, 结果与对照组相比在12~24 h内随着培养时间的增加,脂肪细胞Ob-Rb表达水平量亦显著增加(...