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本研究旨在从猪乳腺组织中分离得到上皮细胞和成纤维细胞，并将EGFP基因导入这些细胞。利用乳腺细胞培养体系从成年猪乳腺组织中分离培养上皮细胞和成纤维细胞，并利用脂质体介导转染技术将EGFP基因导入这些细胞。结果，从成年猪乳腺组织中成功分离培养出上皮细胞和成纤维细胞，获得转EGFP基因上皮细胞和成纤维细胞。上皮细胞呈短梭形或多角形，细胞之间紧密相靠，互相衔接，连接成片；细胞核呈圆形或椭圆形，核仁2~4...
中华蜜蜂Apis cerana cerana是一种真社会性昆虫,也是我国重要的经济昆虫。本实验目的是为了检测精子是否可以作为载体将外源egfp基因介导转入中华蜜蜂。首先将雄蜂精子与线性化的质粒DNA共浴,然后通过人工授精技术将精子导入处女王,再对实验蜂群后代进行分析。结果显示EGFP蛋白在一群实验组蜂的1～2日龄小幼虫中表达较强，能检测到0.01%～0.02%荧光阳性小幼虫个体；通过PCR和RT-...
转EGFP基因山羊克隆胚的发育
绿色荧光蛋白基因 转基因山羊乳腺上皮细胞 转基因克隆胚
2008/4/10
本研究利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒，并将之导入山羊乳腺上皮细胞，经G418筛选获得阳性细胞，以之作为核供体利用核移植技术构建转基因克隆胚。结果如下：用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体，电融合法更适合构建转基因克隆胚。转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液，在培养72 h 后加入10 ％ 的NGS。荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达，大部分克隆胚发育到8...
鸡胚精原细胞体外转染EGFP方法的比较
鸡 精原细胞 增强型绿色荧光蛋白 体外转染
2008/3/28
以增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein，EGFP）为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞（Chicken embryonic spermatogonial cells，CESCs），比较磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法转染EGFP的效率，以获得高效的体外转染方法。本研究分离孵化16 d的鸡胚睾丸，获取CESCs，体外培养和传代扩增，...
转EGFP基因山羊克隆胚的发育
绿色荧光蛋白基因 转基因山羊乳腺上皮细胞 转基因克隆胚
2013/12/27
本研究利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒，并将之导入山羊乳腺上皮细胞，经G418筛选获得阳性细胞，以之作为核供体利用核移植技术构建转基因克隆胚。结果如下：用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体，电融合法更适合构建转基因克隆胚。转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液，在培养72 h 后加入10 ％ 的NGS。荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达，大部分克隆胚发育到8...