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本试验旨在通过快速定量不同发酵时期下发酵豆粕中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的数量,以解决豆粕发酵过程品质监控的瓶颈难题,建立解淀粉芽孢杆菌的实时荧光定量PCR方法。根据解淀粉芽孢杆菌DNA解旋酶A亚基(gyrA)基因及16S核糖体RNA(16S rRNA)基因的保守区设计出3对引物,利用常规PCR筛选出1对特异性引物,并以该引物的扩增产物构建的重组质粒作为...
Evaluation of the microbial population in ruminal fluid using real time PCR in steers treated with virginiamycin
virginiamycin roll-tube technique ruminal fermentation parameters real-time PCR
2015/6/8
The objective of the present study was to investigate the effects of virginiamycin (VM ) supplementation on ruminal fermentation and microbial populations in steers. Four ruminally cannulated Chinese ...
本试验旨在采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析瘤胃菌群在不同纤维素富集条件下的多样性。试验采用羧甲基纤维素(CMC)培养基、蛋白胨纤维素(PCS)培养基、J培养基和K培养基分别在37和50℃条件下培养瘤胃内容物,使用PCR-DGGE技术、DGGE图谱共性及特异性条带的克隆和测序、聚类分析和主成分分析(PCA)几种方法分析瘤胃菌群多样性。结果表明:37℃条件下,不同培养基...
为了了解发酵全混合日粮(TMR silage)发酵过程中的乳酸菌的菌种变化,应用MRS琼脂培养基对新鲜啤酒糟和豆腐渣以及它们的发酵TMR(贮存0、14和56 d)的乳酸菌进行培养,所得的可培养乳酸菌应用PCR-DGGE进行筛选,对菌体DNA的碱基序列进行测定,在GenBank上检索相近的16S rDNA序列对其鉴定。结果表明:2种原料中的乳酸菌种类完全不同;加入相同的其他材料变成TMR后,优势乳酸...
本文旨在采用ERIC-PCR和PCR-DGGE方法研究肉鸡喂服枯草芽孢杆菌后肠道菌群的多样性。选用15羽28日龄肉鸡,按2 mL/kg BW喂服枯草芽孢杆菌悬液(109 CFU/mL),每天2次,连续3 d,34日龄时,利用ERIC-PCR和PCR-DGGE方法分析肠道菌群的多样性,并对DGGE条带进行回收、测序。结果表明,肉鸡口服枯草芽孢杆菌后各肠段的条带数显著多于对照组(P<0.05或P<0....
利用实时定量PCR研究不同蛋白质饲料对嗜淀粉瘤胃杆菌生长参数的影响
蛋白质饲料 嗜淀粉瘤胃杆菌 生长 实时定量PCR
2013/11/23
本试验主要研究不同蛋白质饲料对嗜淀粉瘤胃杆菌(Ruminobacter amylophilus)生长的影响。选用4只装有瘤胃瘘管的徐淮白山羊羯羊,分别饲喂以羽毛粉、玉米蛋白粉、豆粕和鱼粉为蛋白质补充料的4组日粮,进行4×4拉丁方设计的试验,并采用实时定量PCR(RT-PCR)技术对嗜淀粉瘤胃杆菌进行定量分析。结果表明,豆粕组瘤胃氨氮浓度最高,并显著高于其他3组(P<0.05);细菌总数在组间差异不...
根据猪传染性胃肠炎病毒和猪肌动蛋白的基因序列设计合成了引物和探针,通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法。同时对37份现地病料进行检测并与常规RT-PCR方法、TGEV抗原快速检测试剂盒比较。结果,该方法的检测敏感性达到15.3拷贝/μL,且具有很好的特异性和重复性,而常规RT-PCR方法只能检测到1.53×103拷贝/μL。对现地病料的...
马生长激素(GH)基因的PCR-SSCP研究
马 GH 基因 PCR-SSCP 遗传多态性
2013/12/27
选取4个蒙古马地方品种、1个国内培育品种和1个国外引入品种共281匹马,采用PCR-SSCP技术,检测了GH 基因5'侧翼区、第1内含子、第2外显子和第5外显子4个位点的遗传多态性。结果显示:仅第5外显子出现多态性,表现出AA、BB和AB 3种基因型,其余位点未检测到多态。群体遗传学分析结果表明:除纯血马外,其余品种都是等位基因A为优势基因;Hardy-Weinberg平衡检验显示,乌审马、乌珠穆...
Nucleotide Sequencing and PCR-RFLP of Insulin-like Growth Factor Binding Protein-3 Gene in Riverine Buffalo (Bubalus bubalis)
Buffalo IGFBP-3 Sequencing PCR-RFLP Polymorphism
2016/4/15
Insulin-like growth factor binding protein-3 (IGFBP-3) gene is a structural gene associated with the growth and development of the animals. The present investigation was carried out to unravel nucleot...