搜索结果: 1-15 共查到“植物保护学 PCR”相关记录106条 . 查询时间(0.092 秒)
五种玉米病毒多重PCR检测体系的建立
五种玉米病毒 多重PCR检测体系 建立
2021/6/3
玉米在我国农业生产中占据重要地位，而病毒病的长期发生严重威胁我国玉米产业。随着病毒鉴定技术的发展，目前已报道侵染我国玉米的病毒有12种之多（张超等，2017）。病毒检测是病害防控中的重要环节，但田间玉米病毒种类的多样性及其复合侵染的普遍性增加了鉴定难度。
为确定在云南文山地区喜树上发生的疑似丛枝病的病原种类及快速检测喜树丛枝病,本研究利用植原体16S rDNA基因通用引物P1/P7和R16F2n/R16R2对感病喜树总DNA进行常规PCR和巢式PCR扩增、克隆和测序,通过系统进化分析,明确了喜树丛枝植原体属于16SrXXXII组。然后根据喜树丛枝病植原体16S rDNA基因保守区域设计并合成特异性引物和TaqMan探针,制备了喜树丛枝病植原体标准质...
为明确苹果锈果类病毒（apple scar skin viroid，ASSVd）在苹果树体内的转移规律，本研究建立高灵敏度的实时荧光定量反转录PCR （real-time fluorescence quantitative reverse transcriptionPCR，RT-qPCR）方法，利用此方法检测该病毒在树体内的转移规律以及苹果果实上病毒积累量与症状的相关性。结果表明，本研究所建立的R...
【目的】本研究旨在建立TaqMan实时荧光定量PCR(TaqMan RT-qPCR)技术，快速检测单头烟粉虱Bemisia tabaci体内的番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus, ToCV)。【方法】根据 ToCV外壳蛋白保守序列设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针，建立了TaqMan RT-qPCR方法；与常规PCR检测进行比较，检测该方法的灵敏度与特异性；并应用该...
龟裂链霉菌Streptomyces rimosus M527是龟裂霉素（rimocidin）的生产菌，其对多种植物病原真菌具有较强的拮抗作用。为从转录水平分析菌株M527以及其抗性突变株中龟裂霉素的合成调控机制，荧光定量PCR内参基因的选择与稳定性评估显得尤为重要。本研究选用16S rRNAsr、hrdBsr、rpoAsr、sigFsr、sigBsr、gyrBsr这6个基因作为候选内参基因，使用g...
筛选出适合牧草盲蝽Lygus pratensis在不同条件下稳定表达的内参基因。【方法】选取编码牧草盲蝽α-微管蛋白、β-微管蛋白、肌动蛋白、延伸因子、琥珀酸脱氢酶复合体A、泛素、转录起始因子TFIID亚基、谷胱甘肽S-转移酶、核糖体蛋白L32及TATA盒结合蛋白的10条基因为候选内参基因，采用qRT-PCR技术测定其在牧草盲蝽不同性别成虫、成虫不同组织、不同龄期、对功夫菊酯不同抗性成虫、不同温度...
为明确宁夏马铃薯镰刀菌根腐病病原菌种内的遗传差异与亲缘关系，利用ISSR-PCR技术对影响PCR扩增效果的因素和ISSR引物进行优化和筛选，建立适合马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的ISSR-PCR反应体系，并通过ISSR分子标记技术对30株地理来源不同的镰刀菌进行遗传多样性分析。结果显示：马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的ISSR-PCR扩增最适引物为807，20 μL反应体系中2×Easy Taq PCR S...
基于TaqMan MGB探针的葡萄茎枯病菌实时荧光PCR检测方法
葡萄茎枯病菌 实时荧光PCR 检测
2020/3/13
葡萄茎枯病菌是我国进境植物检疫性有害生物。带菌植物材料是病害传播的重要载体,准确、灵敏、快速的检测方法是严格执行口岸检疫措施及研究病害防控措施的有力工具。根据葡萄茎枯病菌及其近似种的细胞骨架蛋白(Actin)基因序列差异,设计并合成1对引物和1条特异性TaqMan-MGB探针,建立了葡萄茎枯病菌的实时荧光PCR检测方法。通过对反应体系的优化,确定了葡萄茎枯病菌的实时荧光PCR最佳反应条件:引物终浓...
‘阳光玫瑰’葡萄病毒小RNA测序鉴定及RT-PCR检测
阳光玫瑰 小RNA测序 葡萄病毒 RT-PCR
2019/12/25
‘阳光玫瑰’是我国从日本引进的葡萄优良品种。为了明确我国‘阳光玫瑰’葡萄病毒病的病原,本研究采用小RNA测序技术对2株显症和无症状的‘阳光玫瑰’葡萄样品进行病毒鉴定结果显示:显症样品中测定到8种病毒,其中包含葡萄蚕豆萎蔫病毒(Grapevine fabavirus, GFabV)和灰比诺葡萄病毒(Grapevine Pinot gris virus, GPGV);无症状样品中测定到3种葡萄病毒。对...
应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B
葡萄 葡萄病毒B 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR
2019/11/18
本研究建立了葡萄病毒B的 SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测技术。该技术标准曲线扩增效率102.4%,相关系数0.999,最低检测限达10-4倍稀释cDNA,灵敏度为常规RT-PCR的100倍。重复性试验组内和组间变异系数分别为0.00%~0.65%和0.02%~2.00%,表明检测稳定性好。该技术对田间葡萄样品检测适用范围广,对枝条和老叶柄检测效果最好,冬季枝条...
通过URP(Universal Rice Primers)-PCR分析尖孢镰孢菌苦瓜专化型基因组DNA扩增片段多态性,筛选检测尖孢镰孢菌苦瓜专化型的特异性引物,并建立了基于该引物的PCR检测方法。结果表明,特异性引物为FOMM-SPF/FOMM-SPR, PCR检测体系为25 SymbolmAL,包括2SymboltB Green Taq Master Mix 12.5 SymbolmAL,10 ...
猕猴桃植株中柑橘叶斑驳病毒实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用
猕猴桃 柑橘叶斑驳病毒 实时荧光定量PCR
2019/11/22
柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus, CLBV)在陕西省栽培猕猴桃中发生普遍。为监测CLBV发生情况,本研究建立了CLBV的实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测方法。该方法特异性强,可准确检测目的病毒,标准曲线斜率为-3.378,决定系数R2=...
稻粒黑粉病菌实时荧光定量PCR内参基因筛选
稻粒黑粉病菌 实时荧光定量PCR 内参基因
2020/2/12
实时荧光定量PCR是一种被广泛应用于基因表达研究的分子技术,内参基因的选择对试验结果的可靠性起重要作用。稻粒黑粉病是一种全球性水稻真菌病害,目前没有关于稻粒黑粉病菌内参基因的报道。本文选择6个常用内参基因,对其在稻粒黑粉病菌不同菌株、不同生活史阶段和不同浓度Basta处理3组生物学样本中的稳定性进行比较分析。经geNorm3.5、NormFinder0.953及BestKeeper1.0软件综合评...
二化螟实时荧光定量PCR内参基因筛选和表达稳定性评价
二化螟 内参基因 荧光定量PCR 基因表达
2019/10/28
【目的】筛选特定试验条件下二化螟(Chilo suppressalis)稳定表达的内参基因，为二化螟基因表达研究奠定基础。【方法】根据二化螟转录组测序结果挑选出11个候选基因，利用实时荧光定量PCR测定其在二化螟不同发育历期、不同组织、温度处理、杀虫剂处理、取食不同饲料、取食不同水稻、dsRNA处理和混合样品的表达量，利用RefFinder、BestKeeper、GeNorm和NormFinder...
3种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立及应用
Sweet potato virus multiplex RT-PCR Sweet potato feathery mottle virus Sweet potato latent virus Sweet potato virus 2
2020/2/12
To effectively monitor the occurrence of major sweet potato viruses, the multiplex RT-PCR assay was established for detection of Sweet potato feathery mottle virus (SPFMV), Sweet potato latent virus (...