搜索结果: 1-15 共查到“蔬菜学 PCR”相关记录18条 . 查询时间(0.097 秒)
在218份马铃薯材料中筛查晚疫病持久抗性基因RB和R8标记的基础上，进一步筛查了马铃薯X病毒（PVX）和马铃薯Y病毒（PVY）极端抗性基因Rx1和Ryadg的标记。利用筛查出的含有Rx1和RB标记的‘德薯3号’和含有Ryadg和R8标记的P182马铃薯资源材料混合DNA为模板，选择已报道的Rx1和Ryadg的标记引物，并根据RB和R8序列设计特异引物，同时设计马铃薯GBSS基因特异引物为内参监控P...
根据文献报道和GenBank 已登录序列设计引物建立了马铃薯Y 病毒（potato virus Y，PVY）实时荧光定量RT-PCR检测技术体系。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系，相关系数R2 为0.991 2，可特异性检测PVY，灵敏度达常规RT-PCR 的1 000 倍，重复性好。利用建立的检测方法对山东省、青海省、贵州省、黑龙江省和河北省5 个地区马铃薯植株中的PVY 进行...
莲藕中甘薯潜隐病毒实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用
莲藕 甘薯潜隐病毒 实时荧光定量PCR
2020/9/14
甘薯潜隐病毒莲藕分离物（sweet potato latent virus-lotus，SPLV-lotus）在江苏省莲藕产区普遍引起发病，并且该分离物序列与已报道的SPLV甘薯分离物存在较大差异。为进一步监测SPLV-lotus在莲藕上的发生情况，针对SPLV-lotus的CP基因设计并优化特异性引物QSPLV-lotus3-F/QSPLV-lotus3-R，通过优化引物浓度和退火温度条件，构建...
为了明确引起茄子斑驳紫花病的病毒种类，利用小干扰RNA（siRNA）高通量测序技术，结合生物信息学方法寻找茄子样本中的病毒序列，发现存在烟草轻型绿花叶病毒（Tobacco mild green mosaic virus，TMGMV）和番茄斑驳花叶病毒（Tomato mottle mosaic virus，ToMMV）。为了验证该结果，对待测样品中TMGMV和ToMMV的外壳蛋白（coat prot...
以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种（Pseudomonas syringae pv. tomato，Pst）的致病相关基因HrpZ为靶序列，设计了特异性引物Pst3F/Pst3R，能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段。建立的Pst实时荧光定量PCR检测技术体系的检测灵敏度比普通PCR高1 000倍。利用实时荧光定量PCR检测体系，检测模拟带菌种子中Pst的...
针对引起番茄细菌性病害的细菌性斑点病菌（Pseudomonas syringae pv. tomato，Pst）、溃疡病菌（Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis，Cmm）、青枯病菌（Ralstonia solanacearum，Rs）以及疮痂病菌（Xanthomonas campestris pv. vesicatoria，Xcv），建立了四...
芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）是白菜类蔬菜生产上的重要病害，其中TuMV VPg 基因在TuMV 侵染白菜类蔬菜的过程中起着至关重要的作用，且不同TuMV 株系的致病性不同。本试验采用改良的重叠延伸PCR（SOE-PCR）技术，以TuMV C4-VPg 基因序列为模板，定点突变TuMV C4-VPg 与TuMV CDN1-VPg 基因间5 个差异核苷酸位点（决定5...
根据辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici Leonian）与致病疫霉菌（Phytophthora infestans）及其他8种常见土传病害病原菌Actin基因序列差异，设计并筛选出辣椒疫霉菌的特异性引物YM2F/YM2R，建立辣椒疫霉菌的实时荧光定量PCR检测体系，并利用该体系定量检测人工模拟带菌样品及田间发病土壤样品中的辣椒疫霉菌。试验结果表明，利用该引物建立的实时荧光定量PC...
为了建立甜菜DAMD扩增体系，以期利用DAMD引物应用于甜菜品种指纹图谱的构建及分子标记辅助育种。本实验利用单因素变量的方法对甜菜DAMD体系进行优化。同时选用12 个甜菜品 种，利用优化的体系对25 条DAMD引物进行扩增。获得甜菜的最适DAMD体系：总体积为20 μL，包含模板DNA 10~80 ng、0.75 U 的DNA 聚合酶、0.2 μL 的dNTPs (2.5 mmol/L each...
为筛选茄子（Solanum melongena L.）高温胁迫下稳定表达的内参基因，以不同茄子品系（种）为研究对象，PCR技术对来自茄子高温胁迫转录组数据库8个候选内参基因（SmEF1a、SmEF2、Sm40sRPS29、Sm60sRPL24、SmTRX、SmCK I、SmDAHPS I、SmUCP）和SmActin在不同试验情况下进行表达检测，并结合GeNorm、NormFinder、BestK...
接头连接介导的PCR 扩增马铃薯抗晚疫病基因侧翼序列研究
马铃薯 晚疫病 抗病基因 外源接头介导PCR
2018/6/28
利用接头连接介导的PCR 技术，以前期NBS profiling 试验获得的1 条马铃薯抗晚疫病基因片段为基础，设计巢式基因特异性引物，扩增获得两侧序列。结果表明：基因组DNA 经DraⅠ酶切后，在已有536 bp 片段的左侧和右侧均得到序列延伸，右侧扩增得到2 301 bp，左侧扩增得到820 bp，去除边界序列后，向左延伸789 bp，向右延伸2 273 bp，拼接后共长3 443 bp。采用...
通过对国内已报道的番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）的DNA-A全基因组进行序列比对分析，发现TYLCV各中国分离物具有较高的相似性。TYLCV全序列及CP序列核苷酸和氨基酸系统发育分析结果显示，中国中东部及东南沿海地区为番茄黄化曲叶以色列病毒（TYLCV-IL）各分离物所侵染，而西部和西南部内陆地区为番茄黄化曲叶中国病毒（TYLCCNV）各分离物所侵染。基因多态性分析结果表明，TYLCV在进化上具有...
花椰菜的ISSR-PCR反应体系的建立与优化
花椰菜 ISSR反应体系 优化
2010/2/23
以花椰菜基因组为材料，对ISSR反应体系中各种影响因子如dNTP浓度，DNA模板含量，Taq DNA聚合酶量浓度，引物用量以及最适退火温度等进行了优化和筛选，建立了适合花椰菜的ISSR反应体系：25μl反应体积, 内含 1×PCR 反应缓冲液（含Mg2+）、0.75Ｕ Taq DNA 聚合酶、0.15mmol/L dNTPs、0.5μmol/L 引物、60ng 模板 DNA。 确定了适宜的退火温度...
马铃薯SRAP PCR反应体系的优化
马铃薯 SRAP 反应体系 优化
2009/9/17
［目的］建立马铃薯大西洋SRAPPCR反应体系，为今后的研究奠定基础。［方法］以马铃薯大西洋基因组DNA为模板，从Mg2+浓度、Taq酶浓度、dNTPs浓度、引物浓度和模板DNA浓度5个方面对大西洋SRAPPCR反应体系进行优化。［结果］适合大西洋的SRAPPCR反应体系为：模板DNA 1.0 μl(50 ng/μl)，Taq酶1.7 μl(1 U/μl)，引物对1.5 μl(...
[ 目的] 为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[ 方法] 利用CTAB 法提取番茄叶片总RNA 进行Real Time PCR 扩增, 分析转Mi
1 .2 基因的番茄植株表达水平的检测体系。[ 结果] 提取RNA 的A260/ A280 为1 .78 ～1 .88 ,RNA 无明显降解。在严谨扩增条件下, 引物SYBR2 的扩增效率高于SYBR1 。Mg2 + 的适宜浓度为2 .0 mg/...