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搜索结果: 1-15 共查到医学细胞生物学 转染相关记录28条 . 查询时间(0.14 秒)
通过构建表达载体、建立稳定转染RNA结合基序5(RNA binding motif 5,RBM5)的A549细胞系,初步研究RBM5基因过表达对A549 细胞增殖以及天冬-谷-丙-组氨酸盒多肽15[DEAH box polypeptide 15,DHX15]表达的影响。方法:应用分段克隆法构建pcDNA3.1(+)/RBM5真核表达载体;将测序验证后的重组质粒pcDNA3.1(+)/RBM5转染肺...
大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因, 观察其作为起搏细胞的可行性。方法 取生长良好的ADSC转染hHCN2基因, 通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达, 用膜片钳技术检测细胞的电生理特征并记录其内向电流。将转染hHCN2基因的ADSC与心室肌细胞共培养, 观察其对心室肌细胞自发性搏动的...
探讨巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor, MIF)重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞后MIF的表达及其对CyclinD1表达的影响。方法 构建并鉴定重组真核表达质粒pEGFP-N1-MIF,转染人宫颈癌SiHa细胞;ELISA法检测细胞上清液中MIF的表达;real-time PCR及免疫细胞化学法检测细胞中MIF、CyclinD1 m...
将构建的乙型肝炎病毒X基因的真核表达载体稳定转染HepG2细胞株, 并研究转染后对p53-p21途径的影响。 方法 用基因转染的方法将已构建的载体pcDNA3.1-HBx 转染入肝癌细胞HepG2中, G418筛选出稳定转染X基因的细胞株。细胞生长曲线、平板克隆形成实验检测转染后肝癌细胞的恶性表型,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,Western blot检测p53蛋白的表达,RT-PCR检测p21基...
目的比较3种不同血清型腺相关病毒(AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率。方法原代分离培养西藏小型猪胚胎成纤维细胞并进行形态学鉴定,按照感染复数(MOI)为103、104、105转染传代两次的猪胚胎成纤维细胞,流式细胞学检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率,并在倒置显微镜下观察转染后绿色荧光的表达强度;同时,应用MTT方法检测不同血清型AAV对西藏小型猪...
肿瘤转移抑制基因nm23-H1基因调控肺癌细胞转移潜能的确切机理尚未明了,本研究旨在探讨人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)的差异表达蛋白,为阐明肺癌转移的分子机制、发现早期诊断肺癌转移的分子标志和新的治疗靶点提供实验依据。方法 应用固相pH梯度双向凝胶电泳分离L9981和L9981-nm23-H1细胞株的总蛋白,对...
泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin C terminal hydrolase-L1,UCH-L1)是近期研究较多的一类癌基因,在多种恶性肿瘤如食管癌、肺癌、乳腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究旨在探讨脂质体转染UCH-L1 siRNA对人肺腺癌H157细胞增殖、凋亡的影响。方法 人工合成抑制UCH-L1基因的siRNA片段,通过脂质体转染到H157细胞内,显微镜下观察其形态学变化;流式...
目的:研究基本转录元件结合蛋白2(BTEB2)反义RNA对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其机制。 方法: 用BTEB2反义腺病毒载体Ad.ASBTEB2转染VSMC,通过RT-PCR检测BTEB2反义RNA在VSMC中的表达;经免疫印迹法检测BTEB2蛋白质表达;通过MTT比色法和流式细胞仪分别检测VSMC增殖及细胞周期;用免疫细胞化学方法分析增殖细胞核抗原(PCNA)、血管紧张素Ⅱ1型受...
目的: 应用基因芯片技术,检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式激活基因1(NS3TP1)的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响,进一步NS3TP1蛋白可能的分子生物学功能.方法: 设计并合成NS3TP1基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS3TP1蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术构建表达载体pcDNA3.1(-)-NS3TP1. 以脂质体技术...
人VEGF基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究。
目的:研究PRL-2基因对肝细胞增殖和细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染的方法将重组质粒稳定转染至正常永生化肝细胞系CL1中,G418筛选阳性克隆。应用实时荧光定量聚合酶链反应、Western印迹和免疫组化分析PRL-2在阳性细胞的表达及蛋白定位,MTT法检测细胞的群体倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western印迹分析细胞周期素A、D1、E以及周期蛋白依赖激酶抑制因子p16、p21WA...
雪旺细胞( schwann cells,SCs)是周围神经系统(PNS)的组成部分,它能分泌神经营养因子,产生细胞粘附分子。经基因转染的SCs能克服神经营养因子水平低,移植后存活时间短等不足,在脊髓损伤基因治疗中起重要作用。
为建立一个促癌剂检测模型,采用电穿孔法,将突变的c-Ha-rasV12G基因转入人胚肺成纤维细胞WI-38中,将获得的G418抗性(G418r)单克隆细胞株进行DNA Dot-印迹及RT-PCR分析后,进一步用佛波醇酯(PMA)处理,并选用克隆形成率, 锚着独立性生长及裸鼠成瘤性等表型改变对受试细胞进行了恶性程度检测. 结果表明:在促癌剂PMA作用下,WI 38基因转染细胞发生了恶性转化,c-Ha...

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